欧美视频一区 I 九九热视频在线观看 I 国内自拍偷拍视频 I 波多野结衣一区二区三区四区 I 久久伊人国产 I 国产日韩欧美亚洲 I 日韩丝袜在线 I 午夜精品网站 I 国产精品一级视频 I 91挑色 I 99riav1国产精品视频 I 成年人在线视频网站 I 视频区小说区 I 国产一级美女 I 美国式禁忌1980 I 国产99久久九九精品无码 I av亚洲在线观看 I 国产精品对白刺激久久久 I 欧美色网在线 I 一个色影院 I 午夜草莓视频 I 日韩国产精品久久久久久亚洲 I 久久精品成人欧美大片 I 中文字幕人妻偷伦在线视频 I 欧美激情六月 I 日韩欧美亚洲系列 I 一本加勒比hezyo无码人妻 I 两性午夜刺激性视频

服務熱線:
15502280048
技術支持

您現在的位置:首頁  >  技術文章  >  本生解讀—ELISA實驗中常見的問題

本生解讀—ELISA實驗中常見的問題
更新時間:2023-03-22瀏覽:1082次

  ELISA實驗中常見的問題


  問題一:哪些樣本可用于ELISA實驗?

  答:血清、血漿、細胞培養上清、組織勻漿、細胞裂解液、尿液、唾液、腦脊液等。不同的樣本類型有不同的處理方法。

  1、血清:指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。血清是 ELISA 實驗常用的樣本,其預處理也十分簡單。

  使用無熱原無內毒素的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置 2 小時或 4℃過夜,分離出血清(建議傾斜試管或離心管以擴大液面的橫截面,使血清可以更大程度地分離出來)。4℃下以1000×g 離心 20 分鐘,小心收集上清液(血清),立即進行測定。建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復凍融。

0 (2).jpg

  在收集血液樣本的過程中應避免溶血,因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質,這種情況下,ELISA 實驗中將會出現非特異性顯色反應,導致檢測結果不準確,出現假陽性結果。另外,樣本還應避免細菌污染,因為細菌可能含有內源性HRP,也會導致檢測結果不準確。

  2. 血漿:是離開血管的全血經抗凝處理后,通過離心沉淀,所獲得的不含細胞成分的液體。血漿與血清的主要區別在于血漿中含有纖維蛋白。

  使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后 30 分鐘內,4℃下以 1000×g離心 15 分鐘,小心收集上清液(血漿)。建議在-20℃或-80℃下將收集的血漿分裝保存,避免反復凍融。樣本應避免溶血或高血脂。常見的抗凝劑包括 EDTA(部分酶相關指標不建議使用),肝素鈉,枸櫞酸鈉等。檢測前請仔細閱讀 ELISA 試劑盒說明書,查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

  3. 細胞培養上清:含有細胞分泌蛋白和死細胞的細胞培養液。

  將細胞培養上清液吸入離心管中并以 1000×g 離心 20 分鐘,除去細胞碎片和雜質,收集上清液備用,樣本保存在-20℃或-80℃,避免反復凍融。

  4. 細胞裂解液:經細胞裂解液裂解后的細胞溶液。

  (1)吸出培養板中的培養基,用胰蛋白酶消化細胞,然后加入適量的培養基將培養板上的細胞沖洗干凈。 懸浮細胞可以省略該步驟。

  (2)將細胞懸浮液收集到離心管中,以 1000×g 離心 10 分鐘,然后吸去培養基,用預冷PBS 洗滌細胞 3 次。

  (3)加入適量的預冷 PBS(建議在使用前立即加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。在 6 孔培養板中,每個孔 需要 150-250μL 的 PBS 來重懸細胞。

  (4) 使樣本在-20℃或-80℃條件和室溫條件下反復凍融,重復凍融過程數次,直至細胞裂解。也可 以使用超聲波細胞破碎器超聲處理懸浮液來裂解細胞。

  (5) 4℃下以 10,000×g 離心 10 分鐘,去除細胞碎片,收集上清液, -20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

  5. 組織勻漿

  (1) 用預冷的 PBS(0.01M,PH7.4)沖洗組織以除去表面殘留的血液或雜質。

  (2) 將組織塊稱重,然后切成盡可能小的碎塊,以便充分勻漿。

  (3) 加入適量的預冷 PBS(體積取決于組織的重量,9 mL PBS 適用于 1 g 組織,建議使用前立即在 PBS 中加入適量蛋白酶抑制劑),用玻璃勻漿器在冰上或冰浴中充分勻漿。

  (4) 將勻漿液吸入離心管中,4℃ 下以 5000×g 離心 5~10 分鐘,收集上清液,保存至-20℃或-80℃, 避免反復凍融。

  一般來說,由于 ELISA 實驗只能檢測可溶性蛋白質的含量,因此要求樣本應清晰透明并離心除去沉淀物或懸浮物質。為確保實驗的準確性, -20℃或-80℃保存的樣本應在 1-6個月內完成檢測,4℃保存的樣本在一周內完成檢測。

  問題二:ELISA法一般都能檢測血清、血漿和細胞上清嗎?

  答:不能。原因主要從指標適應性和體系適應性2個方面來說明。

  首先,我們要根據既往的研究和文獻報道確認,我們所檢測的靶標是否在血清、血漿中有正常表達,是否在疾病狀態,特殊生理時期,特定的生物鐘時會分泌表達,如果以上幾種情況都不存在,或者暫時沒有研究結果支持,那么使用血清或血漿檢測可能無信號值。另外,ELISA 方法并不是只能檢測分泌性靶標,某些靶標經適當的裂解作用后,釋放出靶標蛋白的樣本同樣可以進行檢測,目前我們的產品中也有不少此類靶標。再說,細胞上清樣本。同樣的,需要根據既往的研究和文獻報道或者客戶的實驗設計確認,我們所檢測的靶標是否分泌到上清中,如果無研究和文獻支持,那么檢測可能無信號值。也就是不適合使用上清樣本檢測。

638130929389774357834.jpg

  其次,我們使用的血清、血漿、細胞上清樣本屬于復雜基質的樣本,常常混合了其他與靶標蛋白可能發生結合的或者多種非特異性物質造成的對檢測靶標蛋白的干擾,也就是基質效應。那么我們的 ELISA 產品要適應這樣的情況,則需要使用適當的生產體系和測試體系來解決這樣的問題。這就是我們的檢測體系從外觀看都一樣,但是實際成分不一樣的原因。當體系不合適時,可能存在嚴重的基質效應無法消除,從而干擾測試的準確性。也就是為何,有的產品只能檢測血清、血漿,有的產品只能檢測細胞上清了。

  問題三:為什么要做預實驗?

  答:通過預實驗可以確定樣本的大致濃度范圍,防止樣本濃度過高或者過低得不到較好的結果,同時也可以節約樣本和試劑盒。

  問題四:預實驗做過標曲,正式實驗還需要做標曲嗎?

  答:需要。原因是避免出現樣本全陰性時無陽性對照。

  問題五:怎么解釋樣本越稀釋濃度值越高?

  答:一種原因是樣本受基質效應的影響。通過剃度稀釋可以消除基質的影響,稀釋過后的樣本濃度會出現先升高再下降的趨勢。

  另一種原因是樣本受藥物的影響。

  elisa試劑盒本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。


本生(天津)健康科技有限公司 版權所有    備案號:津ICP備19006588號-1

技術支持:化工儀器網    管理登陸    網站地圖

聯系電話:
18502669006

微信服務號

主站蜘蛛池模板: 一区二区久久精品66国产精品 | 天堂素人约啪 | 日本aa大片在线播放免费看 | 99草在线视频 | bbb人妖另类老太婆性恋 | 国产做爰xxxⅹ久久久小说 | 密臀av在线播放 | 97干在线| 黄色网久久| av黄色免费看 | 成人a v视频在线观看 | 尤物一区二区三区精品 | 理论片午午伦夜理片影院99 | 亚洲乱码av一区二区 | 第四色影音先锋 | 久久久久青草大香综合精品 | 国产成人免费在线观看视频 | 亚洲色在线无码国产精品 | 青青青看免费视频在线 | 日日噜噜夜夜狠狠久久蜜桃 | 2020亚洲视频| 国产无内肉丝精品视频 | 成 人 黄 色 视频免费播放 | 亚洲第一福利网站在线观看 | 亚洲另类丝袜综合网 | 久久激情五月 | 午夜视频在线观看视频 | 成在人线av无码免观看麻豆 | 99热日本| 大黑人交xxxx18视频 | 13小箩利洗澡无码视频网站 | 色综合久久中文 | av网站观看 | 狠狠躁夜夜躁人人爽超碰女h | av永久免费网站 | 日本丰满熟妇毛茸茸xxx | 99精品无码一区二区 | 精品久久久久久久久久软件 | 五月综合色 | 日本一区二区高清 | 午夜激情福利在线 | 日韩精品成人一区二区三区视频 | 成人自拍小视频 | 国产成人一区二区无码不卡在线 | 在线看黄免费 | 日韩在线免费 | 国产熟妇人妻精品一区二区动漫 | 国产精品免费久久久久久久久久中文 | 日韩三级视频在线观看 | 男女草逼 | 中日韩高清无专码区2021 | 免费无码一区二区三区蜜桃大 | 极品大长腿啪啪高潮露脸 | 欧美日本三级 | 精品麻豆一区二区三区乱码 | 日日草日日干 | 精品亚洲国产成人蜜臀优播av | 91tv国产成人福利 | 午夜影院色 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 在线免费观看av网站 | 久久久久人妻一区二区三区 | 最近中文字幕在线中文视频 | 毛片网站在线播放 | 欧美日韩精品一二区 | 色播影院性播影院私人影院 | 成 人 黄 色视频免费播放 | 中文字幕久久久人妻无码 | 国产伦精品一区二区三区 | 成人av无码一区二区三区 | www网站在线观看 | 青青草国产免费久久久下载 | 手机看毛片网站 | 中文字幕在线日亚州9 | 麻豆精品国产精华精华液好用吗 | 日韩一区二区三区久久 | 色婷婷综合久色aⅴ五区最新 | 色视频www在线播放国产成人 | 粉嫩久久99精品久久久久久夜 | 亚洲日韩v无码中文字幕 | 国产福利精品一区二区 | 欧美肥老太牲交 | 特级毛片在线观看 | 日韩精品免费在线观看视频 | 91爱国产 | 久久久g0g0午夜无码精品 | 国产第二页 | 亚洲午夜av久久久精品影院 | 大陆av在线 | 一区二区三区视频观看 | 精品国产乱码久久久久久口爆 | 国产精品国产成人国产三级 | 精品国产sm最大网站 | 欧美大逼逼 | 香蕉久久福利院 | 午夜性影院爽爽爽爽爽爽 | 午夜 国产| 五月丁香综合缴情六月小说 | 一边吃奶一边添p好爽故事 国产偷窥自拍视频 | 欧美日韩国产激情 | 免费婷婷 | 精品国产亚洲一区二区三区 | 免费观看性欧美大片无片 | 亚洲mv国产mv在线mv综合试看 | 最新的中文字幕 | 69风韵老熟女口爆吞精 | 亚洲精品无码专区在线在线播放 | 夜夜操天天艹 | 国内精品久久久久久久影院 | 亚洲跨种族黑人xxxxx | 搜索毛片 | 果冻传媒少妇借种av剧情在线 | 亚洲成人在线网 | 国产精品黑色丝袜高跟鞋 | 四虎看黄| 亚洲欧美日韩_欧洲日韩 | 好紧好爽再进去一点在线视频 | 久久精品国产99国产精偷 | 日本高清dvd | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 波多野结衣一区二区三区中文字幕 | 欧美日韩一级久久久久久免费看 | 夜鲁夜鲁夜鲁视频在线观看 | 天天做av天天爱天天爽 | 国产chinasex对白videos麻豆 | 少妇爆乳无码专区av无码 | 中文国产乱码在线人妻一区二区 | 性高潮久久久久久久 | 日本丰满老妇bbw | 国产三区视频在线观看 | 欧美 亚洲 丝袜 清纯 中文 | 农村乱人伦一区二区 | 一本大道东京热无码视频 | 国产69精品久久久久乱码免费 | www.91在线视频| 国产精品永久免费 | 五月婷婷激情综合 | 国产精品女主播 | 5d肉蒲团之性战奶水欧美 | 91精品久久久久久久久青青 | 日本无码人妻精品一区二区蜜桃 | 成人免费无码大片a毛片直播 | 最新欧美精品一区二区三区 | 国产超碰人人做人人爱ⅴa 99re6热在线精品视频观看 | 久久综合精品成人一本 | 黄色片久久久 | 一本av高清一区二区三区 | 国产日韩在线播放 | 欧洲成人一区二区 | 亚洲区精品区日韩区综合区 | 各种少妇正面着bbw撒尿视频 | 激情六月综合 | 亚洲美女午夜一区二区亚洲精品 | 欧美日韩在线看 | 97午夜理论片影院在线播放 | 久久精品国产999久久久 | 欧美精品国产一区 | 国产淫视频| 欧美一区视频在线 | 欧美另类国产 | 好男人www社区免费视频 | 国产精品卡一卡2卡三卡网站 | 国产又爽又黄又湿免费99 | 国产精品久久久免费 | 国产尤物视频在线 | gogo午夜高清免费摄影 | 中文字幕日产乱码中 | 亚洲人成亚洲人成在线观看 | 国产玖玖在线 | 性开放天体www偷拍 中文字幕人妻熟在线影院 日韩av片无码一区二区三区 | 日韩精品无码专区免费视频 | 麻豆自媒体 一区 二区 | 天天干天天操 | 最新精品香蕉在线 | 亚洲精品视频久久 | 射精专区一区二区朝鲜 | 国产精品无码一区二区三区在 | 大狠狠大臿蕉香蕉大视频 | 人妻夜夜爽天天爽爽一区 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 亚洲va在线va天堂va欧美va | 亚洲成人黄色网 | 亚洲人成在线免费观看 | 免费无码麻豆av片在线观看 | 日韩精品一区二区三区老鸭窝 | 国产一区二区精品 | 国产视频每日更新 | 久久久九九精品国产毛片a片 | 在线观看一区二区三区国产免费 | 女厕偷窥一区二区三区 | 国产桃色视频 | 精品av一区二区 | 怡红院一区二区三区在线 | 天堂v在线视频 | 国产精品宾馆在线精品酒店 | 天堂8在线天堂资源bt | 国产亚洲欧美精品一区 | 一二区视频 | 色妞www精品视频二 日韩av在线观看免费 | 新黑暗圣经在线 | 成人18夜夜网深夜福利网 | 又深又粗又爽又猛的视频 | 久久亚洲网| 国产在线观看高清视频黄网 | 雪白扔子视频大全高清在线观看 | 无码国产精品一区二区免费vr | 欧美大黑bbbbbbbbb在线 | 水蜜桃色314在线观看 | 国产97公开成人免费视频在线观看 | 在线资源天堂 | 国产精品久久久久久亚洲影视公司 | 中文字幕日韩在线播放 | 一级 黄 色 毛片 | 老外和中国女人毛片免费视频 | 国产精品一区二区人人爽 | 一区二区三区视频免费 | 亚洲婷婷在线 | 人妻丰满熟妇av无码区动漫 | 亚洲精华国产欧美 | 无人去码一码二码三码区 | 国产偷亚洲偷欧美偷精品 | 西西人体www大胆高清视频 | 色综合天天无码网站 | 19禁无遮挡啪啪无码网站 | 国产精品久久午夜夜伦鲁鲁 | 妓女妓女一区二区三区在线观看 | 69伊人 | 日本添下边视频全过程 | 国产手机av在线 | 78亚洲精品久久久蜜桃网 | 国产 精品 自在 线 亚洲国产免费 | 精品不卡一区 | 最新高清中文字幕免费mv | 999精品视频一区二区三区 | 日本一级黄色录像 | 亚洲欧美视频二区 | 在线一二三区 | 亚洲中文字幕无码久久精品1 | 在线免费观看亚洲 | 主站蜘蛛池模板: 蛛词}| 久久综合九色综合欧洲98 | 国产免费又色又爽又黄女性同恋 | 国产情侣一区 | 农夫色综合 | 日韩美av | 成熟亚洲日本毛茸茸凸凹 | 国产免费无码av片在线观看不卡 | av基地网 | 中文字幕在线视频第一页 | 国产黄色美女 | av在线播放不卡 | mm31美女爽爽爽爱做视频vr | 欧美一区内射最近更新 | 国产美女遭强高潮网站下载 | 亚洲国产成人欧美在线观看 | 中文字幕欧美人妻精品一区 | 免费女人18毛片a毛片视频 | 噜噜噜天天躁狠狠躁夜夜精品 | 香港三级日本三级韩级人妇 | 婷婷亚洲天堂 | 亚洲精品久久久久久久久久 | 欧美精品videosex极品 | 日韩版在线看免费 | 精品一区不卡 | 无码国产色欲xxxxx视频 | 国产亚洲美女精品久久久久 | 97人人爽人人 | 午夜精品国产精品大乳美女 | 久涩涩福利视频在线观看 | v11av在线播放 | av片手机在线观看 | 鲁丝片一区二区三区免费 | 伊人久久大香线蕉成人 | 久久伊人色av天堂九九 | 成人免费淫片aa视频免费 | 影音先锋国产精品 | 国产无夜激无码av毛片 | 国产成人乱色视频网站 | 久爱www成人网免费视频 | 男女无遮挡毛片视频免费 | 日韩一区二区三区免费 | 日韩女优在线播放 | 国产精品夜夜嗨视频免费视频 | 亚洲性av网站 | 99在线精品视频免费观看20 | 日韩欧美偷拍高跟鞋精品一区 | 亚洲欧美在线播放 | 亚洲一本二卡三卡四卡乱码 | 日皮视频免费 | 成人毛片一区二区三区 | 国产情侣一区二区 | 人妻影音先锋啪啪av资源 | 18禁高潮出水呻吟娇喘蜜芽 | 东京热久久综合久久88 | 99热偷拍 | 日本免费黄色 | 免费观看日本 | caoporm视频| 欧美看片 |